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【应用实例】SparkFlux-2000电雾式检测器：助力三七总皂苷分析研究

时间：2025-09-23 10:17

1. 前言

三七总皂苷是中药三七（学名：Panax notoginseng）中提取的一类重要活性成分，属于三萜皂苷类化合物。三七皂苷具有多种药理作用，包括抗炎、抗凝血、抗肿瘤、抗氧化、抗疲劳、抗衰老等。这些皂苷成分在心血管疾病、肝脏疾病、神经系统疾病等多种疾病的预防和治疗中展现出显著的临床应用价值。

三七总皂苷的主要成分包括人参皂苷Rg1、Re、Rb1等，这些成分在生物体内具有多种生理活性，如增强免疫力、改善微循环、促进细胞代谢等。由于三七总皂苷的复杂性和多样性，其在药物研发和临床应用中具有重要的研究价值。

三七皂苷1.jpg

图1：三七皂苷的结构图

尽管三七总皂苷具有重要的药理作用和临床应用价值，但其检测和分析面临一些挑战。主要难点包括：三七总皂苷分子结构中缺乏能够吸收紫外光的发色团，这使得传统紫外检测的灵敏度低，背景干扰大，难以准确定量分析。虽然蒸发光散射检测器（ELSD）和折光指数检测器（RI）能够实现非挥发性无紫外吸收三萜皂苷的分析，但这些检测器在重复性、梯度适应性等方面存在不足。此外，三七总皂苷的样品通常包含多种成分，这些成分的极性、分子量和结构差异较大，增加了分离和检测的难度。

1-截取.jpg

电雾式检测器（CAD）是一种通用型检测器，适用于多种类型的化合物，特别是对于缺乏紫外吸收的化合物具有显著优势。CAD通过产生带电的气溶胶粒子来检测化合物，具有高灵敏度、宽线性范围和良好的选择性。本研究拟采用配备Sparkflux-2000型电雾式检测器（CAD）的高效液相色谱（HPLC）系统，以发展一种精确的三七总皂苷分析方法。

2. 样品配置方法

2.1 样品三七总皂苷，纯度>80%。

2.2 配置方法溶剂为甲醇，配置浓度为3.3 mg/mL。

3. 分析条件

3.1 分析条件一

样品浓度：3.3 mg/mL三七皂苷

色谱柱：EC-C18柱（150 mm×4.6mm，5um）

流动相：甲醇/水，流速：1mL/min

CAD检测条件：蒸发温度（35 ^oC）

T（min）	B%（甲醇）
0	40
5	40
45	80
60	80
62	40
65	40

表1：分析条件一的梯度表

3.2 分析条件二

色谱柱：Eclipse Plus C18（4.6×150 mm, 3.5um）

流动相：A（纯水），B（甲醇）

CAD检测条件：蒸发温度（35 ^oC）

T（min）	B%
0	25
5	25
55	95
60	95
65	25
70	25

表2：分析条件二的梯度表

3.3 分析条件三

分析方法：

样品浓度：3.3 mg/mL三七皂苷

色谱柱：Agilent EC-C18柱（4.6 x 150 mm, 4 um）

流动相：乙腈/水，流速：1mL/min

CAD检测条件：蒸发温度（35 oC）

T（min）	B%（乙腈）
0	20
20	40
30	80
35	90
40	20

表3：分析条件三的梯度表

4. 结果与讨论

4.1 紫外分析vs Sparkflux-2000-CAD分析

如图2所示，对比紫外检测和Sparkflux-2000-CAD检测结果，可见，在分析方法一条件下（甲醇/水梯度），CAD检测可以全面检测到三七提取物中的高含量和低含量的皂苷成分，基线也几乎不随梯度发生显著漂移。

而即使在203 nm波长下，紫外检测也只能检测到数个高含量的皂苷，且基线随着梯度变化发生显著的漂移，这与甲醇截止波长较大，低波长下，基线随着甲醇含量变化会产生显著漂移。

结果表明，CAD是替代传统紫外检测器检测弱紫外吸收三七皂苷成分的最佳选择之一。

三七皂苷2.png

图2：紫外分析与CAD分析结果对比图

4.2Sparkflux-2000-CAD重复性分析

如图3所示，以甲醇/水为流动相，采用分析条件二为洗脱梯度，重复分析三七提取物五次结果表明，不管是高含量的成分还是低含量成分，都获得了很好的重复。

结果证明，采用Sparkflux-2000-CAD具有优异的重复性，适合用于中药成分的质量评价研究。

三七皂苷3.png

图3：Sparkflux-2000-CAD重复性分析结果图

4.3Sparkflux-2000与Corona™ Veo™ RS对比分析

1.分析灵敏度比较

如图4所示，从色谱图的观察结果来看，Sparkflux-2000方法得到的峰值更高，在相同的分析条件和相似的基线噪音水平前提下，这表明Sparkflux-2000具有更高的灵敏度。此外，Sparkflux-2000检测得到的谱图能够观察到更多低含量的色谱峰，这一点进一步验证了其高灵敏度的特点。

三七皂苷4.png

图4：Sparkflux-2000与Corona™ Veo™ RS分析色谱图对比分析结果图

2. 峰面积重复性分析

如表3所示，在大多数峰（1, 2, 3, 5, 6, 7, 8）的分析中，Sparkflux-2000（DCCM-CAD）方法的相对标准偏差（RSD）值显著低于Corona™ Veo™ RS（PCCM-CAD）方法。这一结果表明，Sparkflux-2000在分析重复性方面表现更为优异。对于峰4，尽管两种方法的RSD值较为接近，但Sparkflux-2000方法的RSD值仍然略低，进一步证实了其在重复性方面的优势。