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【应用实例】SparkFlux-2000电雾式检测器：淫羊藿的高灵敏度新型检测方式

时间：2025-09-23 10:23

1. 前言

淫羊藿（Epimedium spp.）作为传统补益类中药，其药理活性广泛，主要活性成分黄酮类化合物（如淫羊藿苷、朝藿定等）具有补肾壮阳、抗骨质疏松、免疫调节、抗氧化及抗肿瘤等作用。随着现代药理学研究的深入，淫羊藿及其制剂的质量控制需求日益凸显。目前，其检测方法多依赖于高效液相色谱-紫外检测法（HPLC-UV）或液相色谱-质谱联用技术（HPLC-MS），但前者因黄酮类化合物紫外吸收特性差异易导致灵敏度不足，后者虽灵敏度高却受限于仪器成本及操作复杂性。

此外，现有方法在复杂基质干扰下对微量成分的准确定量、多组分同步分析及结构类似物的区分能力仍存在局限，尤其是针对极性相近的黄酮苷类成分时，常面临色谱分离度不足、前处理步骤繁琐等问题。因此，开发高选择性、高灵敏度的新型检测技术，结合多维分析方法优化，对完善淫羊藿质量评价体系、保障其临床疗效及安全性具有重要意义。

淫羊藿1.png

图1：淫羊藿植物图

电雾式检测器（Charged Aerosol Detector, CAD）作为非选择性检测技术的代表，凭借其独特的气溶胶荷电机制，在痕量化合物及弱紫外吸收成分的分析中展现出显著优势。其工作原理基于洗脱液雾化形成带电微粒，通过检测微粒表面电荷信号强度实现化合物定量，具有灵敏度高（可达pg级）、动态线性范围宽（>4个数量级）及抗基质干扰能力强等特性。针对淫羊藿黄酮苷类成分（如淫羊藿苷、朝藿定等）存在紫外吸收弱、结构类似物多、基质背景复杂等分析难点，本研究拟构建高效液相色谱-电雾式检测器（HPLC-CAD）联用技术平台，采用配备新一代Sparkflux-2000型超高效CAD检测器的色谱系统，通过优化雾化参数与电荷信号放大模式，开发基于电荷响应普适性的黄酮苷类成分高精准定量分析方法，以解决传统紫外检测法灵敏度不足、质谱法成本高昂等问题。

2. 样品配置方法

2.1 样品淫羊藿茎叶

2.2 配置方法溶剂为90%甲醇，配置浓度为100 mg/mL。

3. 分析条件

样品浓度：100 mg/mL淫羊藿茎叶提取液

色谱柱：Ulitimate XB-C18（150 mm×4.6mm，5um）

流动相：乙腈/0.1%甲酸水，流速：1mL/min

紫外检测波长：203nm

CAD检测条件：蒸发温度（35 ^oC）

表1：分析条件梯度表

T（min）	B%（乙腈）
0	10
3	10
35	90
45	90
47	10

4. 结果与讨论

4.1 紫外分析vs Sparkflux-2000-CAD分析

如图2所示，对比紫外检测和Sparkflux-2000-CAD检测结果，相较于传统紫外检测法（UV-DAD）在203 nm波长下受黄酮苷类成分吸光度差异限制（仅可识别几种高丰度成分），CAD凭借其非光学依赖的电荷响应机制，可同步捕获提取物中高/低含量黄酮苷类成分。同时，CAD对低含量成分的检出限（LOD）较紫外法降低了许多，且色谱响应差异性降低，显著提升复杂基质中多组分分析的覆盖度与可靠性。