【应用实例】SparkFlux 2000电雾式检测器（CAD）：破解天然产物制备检测难题，制备色谱“

一、   前言

长期以来，无/弱紫外吸收成分的检测是天然产物制备的技术瓶颈。诸如人参多糖、灵芝酸、天麻素等完全无紫外吸收的成分，由于缺乏生色团，紫外检测器难以对其进行有效捕捉。对于弱紫外吸收成分，例如人参中的三萜皂苷类，由于其结构仅含一个双键，导致紫外吸收能力较弱，检测时需对流动相背景吸收提出高要求，通常仅可选用昂贵的色谱乙腈作为流动相，并配合低波长进行检测，而无法采用更为廉价的甲醇，这无疑增加了分离制备的成本，进而限制了相关研究与应用的发展。蒸发光检测器（ELSD）虽能在一定程度上解决无紫外吸收成分的检测问题，但也存在若干问题，最为主要的是重复性较差，以及 S 形响应曲线（低浓度响应差，高浓度响应过强）的缺陷。

电雾式检测器作为一种气溶胶检测器，在灵敏度和检测范围方面表现出色，有效克服了蒸发光检测器的诸多不足。然而，进口电雾式检测器价格昂贵，多用于与分析液相色谱联用，鲜有与制备色谱联用的案例。在这一背景下，SparkFlux 2000电雾式检测器（CAD）作为完全国产化的设备，具有极高的性价比，有望填补了这一空缺。该检测器已成功应用于多种无紫外或弱紫外吸收活性天然产物的分析检测（详见此前发布的推文）。这些应用实例证明了该检测器在提高检测灵敏度、扩大检测范围以及优化分析方法方面的显著优势，使其成为天然产物制备检测领域极具潜力的“黄金搭档”。为了验证SparkFlux 2000-CAD与制备色谱联用的效果，我们通过分流将部分制备洗脱液引入SparkFlux 2000-CAD，对三七皂苷进行的制备分离检测测试。

二、   仪器与实验

2.1 仪器

如图1所示，该系统采用岛津8A制备色谱，并配备了10A紫外检测器和SparkFlux 2000-CAD。紫外检测器串联接入流路，利用三通接头和分流管，在主流路上分流出0.5mL/min的流量，进而引入CAD，完成检测过程。

图1 配备紫外检测器和CAD的制备色谱系统

2.2 样品配置方法

总皂苷含量为80%的三七皂苷提取物，以纯水为溶剂配成10 mg/mL的溶液，过膜后置于4℃冰箱备用。

2.3 分析条件

进样体积：5 mL

流动相：甲醇/水，流速：30 mL/min

紫外检测波长：203 nm

CAD检测条件：电压 3 kV，蒸发温度（35 ^oC），增益1。

三、   结果与讨论

图2的结果展示了三七皂苷提取物在反相制备色谱上分别通过紫外检测器和SparkFlux 2000-CAD获得的色谱谱图。结果显示，在紫外检测器上仅能观测到约10个色谱峰，这是因为流动相中甲醇的背景吸收过强，致使大部分低含量成分的色谱峰被掩盖。

与之相比，通过SparkFlux 2000-CAD检测获得的色谱图上，色谱峰数量远超紫外检测器，且部分谱峰因信号强度超出量程范围而出现平台。这表明，采用SparkFlux 2000-CAD能够实现皂苷类成分在甲醇-水流动相体系中的高灵敏检测。

然而，过高的响应值对制备流程并非全然有利，它可能会使信号超出量程范围，从而形成平台峰。针对这一问题，我们可以通过调整SparkFlux 2000-CAD增益参数，有效降低峰高，从而改善上述问题。

图2 紫外检测器vs CAD检测三七皂苷的制备色谱图

综上结果显示，借助 SparkFlux 2000-CAD 与制备色谱联用技术，有望分离制备出更多具有潜在活性的成分。在后续研究中，可进一步结合质谱联用等其他分析手段，对分离制备得到的成分开展更精准的定性定量分析以及活性研究，从而推动天然产物在医药、保健品等领域的开发与应用。